过表达细胞系构建服务

过表达细胞系的开发首先是将目的基因导入宿主细胞，随后通过抗性基因进行筛选，并最终经鉴定得到目的基因持续过表达的细胞株。上海纬尔津生物科技有限公司提供细过表达细胞构建一站式服务，从基因构建、慢病毒包装、过表达细胞构建和过表达检测。公司过表达细胞系构建服务利用慢病毒系统，具备宿主细胞系广，除构建单个基因表达外还能构建多个基因的过表达。

| 服务流程

| 服务内容

01 目的基因构建到慢病毒载体上，通常使用pLVX-IRES-puro载体。

02 三质粒转染HEK293T细胞包装慢病毒。

03 慢病毒感染宿主细胞，抗生素筛选获得稳定表达的细胞株。

04 检测目的基因的表达，膜蛋白可以用流式检测，细胞内蛋白用western blot检测。

| 案例分享

难点： CD3基因由四个基因构建，同时需要TCR的表达才能在细胞膜上过表达。为了构建CD3过表达细胞株，纬尔津公司构建了CD3D、CD3E、CD3G、CD3Z、TCRb、TCRa六个基因同时过表达细胞株，成功实现CD3在不同宿主细胞的过表达。